1917年(民国六年)4月,博物馆正式开馆。2006年5月,旅顺博物馆被国务院、国家文物局列为“全国重点文物保护单位”。2008年被国家文物局评为首批“国家一级博物馆”,也是大连市唯一一家国家一级博物馆。